Un épithélium pluristratifié dérivé du palais mou bovin comme modèle d’infection persistante par le virus de la fièvre aphteuse
Résumé
La fièvre aphteuse, due au Foot-and-Mouth virus (FMDV), est une maladie hautement contagieuse qui touche les artiodactyles domestiques et sauvages et occasionne des pertes économiques considérables. La maladie est difficile à contrôler ; il existe en effet une persistance virale asymptomatique chez certains bovins et ovins, vaccinés ou non, au-delà de 28 jours post-infection. Ces animaux constituent une source de transmission potentielle de la maladie.
Chez le bovin, les cellules épithéliales du nasopharynx ont été identifiées expérimentalement comme un site de réplication virale, à la fois lors de la phase aiguë de l’infection et lors de la phase éventuelle de persistance.
Pour étudier les mécanismes biologiques déterminant la persistance, nous avons développé un modèle in vitro d’infection persistante en cellules épithéliales du palais mou dorsal. Les cellules primaires ont été récoltées en abattoir et cultivées à l’interface air-liquide. Une partie des cultures a été infecté avec un virus FMDV de type O.
Après 5 semaines de culture, les cellules avaient constitué plusieurs couches superposées. Environ 20 % d’entre elles adoptaient une morphologie polygonale et montraient des jonctions serrées. La majorité des cellules exprimaient la vimentine, néanmoins l’expression des cytokératines était présente de manière multifocale. Un effet cytopathique limité a été observé après infection virale. Le virus vivant, les antigènes viraux ainsi que l’ARN viral ont été détectés dans les cellules ou leur surnageant de J1 à J28 post-infection (pi), avec une quantité maximale à J1 et J2. La proportion de cellules infectées était la plus élevée à 24h. A 28 jours pi, le virus vivant était détecté dans 6/8 cultures.
Ce nouveau modèle de cellules bovines du palais mou peut être maintenu sur une longue durée sans passage cellulaire. Il montre plusieurs caractéristiques de l’épithélium du palais mou. Nous avons reproduit une infection persistante par le virus FMDV dans ce modèle et espérons l’utiliser pour améliorer le diagnostic et/ou le contrôle de l’infection persistante par le virus FMDV.